-
技術(shù)文章ARTICLE
CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)在免疫細(xì)胞轉(zhuǎn)染中的應(yīng)用研究進(jìn)展
發(fā)布時(shí)間： 2026-06-29 點(diǎn)擊次數(shù)： 7次CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)的出現(xiàn)為免疫細(xì)胞功能改造提供了重要工具。通過轉(zhuǎn)染導(dǎo)入Cas9蛋白和單向?qū)NA可以在基因組特定位點(diǎn)產(chǎn)生雙鏈斷裂利用細(xì)胞的非同源末端連接或同源定向修復(fù)機(jī)制實(shí)現(xiàn)基因敲除敲入或精確修飾。在免疫學(xué)研究領(lǐng)域CRISPR-Cas9技術(shù)已被應(yīng)用于T細(xì)胞NK細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等多種免疫細(xì)胞的功能研究中。
在T細(xì)胞免疫治療研究中利用CRISPR-Cas9技術(shù)敲除程序性死亡受體1基因和內(nèi)源性T細(xì)胞受體基因已成為增強(qiáng)CAR-T細(xì)胞抗腫瘤活性的策略。程序性死亡受體1是T細(xì)胞表面的檢查點(diǎn)分子其配體在腫瘤微環(huán)境中高表達(dá)導(dǎo)致T細(xì)胞功能耗竭。通過基因編輯敲除程序性死亡受體1可以解除這種抑制作用提升CAR-T細(xì)胞的持久性和殺傷能力。同時(shí)敲除內(nèi)源性T細(xì)胞受體可以減少移植物抗宿主病風(fēng)險(xiǎn)為通用型CAR-T細(xì)胞治療奠定基礎(chǔ)。
將CRISPR-Cas9組分遞送進(jìn)入免疫細(xì)胞是技術(shù)實(shí)施的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。目前常用的遞送方式包括電穿孔法和核糖核蛋白復(fù)合物直接轉(zhuǎn)染法。核糖核蛋白復(fù)合物是將Cas9蛋白與向?qū)NA在體外預(yù)先組裝形成復(fù)合物然后通過電穿孔導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)。與質(zhì)粒遞送相比核糖核蛋白遞送具有脫靶效應(yīng)低和轉(zhuǎn)染后起效快的特點(diǎn)因?yàn)镃as9蛋白在細(xì)胞內(nèi)存在時(shí)間較短完成編輯后即被降解。Zeta life公司的轉(zhuǎn)染試劑配合優(yōu)化的電轉(zhuǎn)方案可用于提高核糖核蛋白復(fù)合物進(jìn)入原代免疫細(xì)胞的效率。
-
血清系列
-
細(xì)胞轉(zhuǎn)染
-
支原體清除
-
細(xì)胞凍存
-
實(shí)驗(yàn)耗材
-
分子試劑
-
細(xì)胞增殖與凋亡
-
Biozellen系列
-
培養(yǎng)基
-
ELISA試劑盒
-
TOYOBO（東洋紡）
-
ZYMO RESEARCH
-
Greiner（格瑞納）
-
IKA（艾卡）
-
化學(xué)發(fā)光底物（ECL）
-
PROSPEC系列
-
Epigentek系列
-
微生物檢測(cè)
-
細(xì)胞生物學(xué)
-
Corning康寧
-
解離試劑
-
細(xì)胞類-實(shí)驗(yàn)耗材
-
原代細(xì)胞
-
植物檢測(cè)系列試劑盒
-
SERANA
-
細(xì)胞系
-
生化試劑盒
-
環(huán)境檢測(cè)系列試劑盒（AKEN）
-
類器官培養(yǎng)
-
緩沖器和解決方案
-
生物三凝膠基質(zhì)
-
細(xì)胞因子分子
-
生物樣本庫
-
蛋白研究系列
-
修飾檢測(cè)試劑盒
