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技術(shù)文章ARTICLE
Zeta Life Advanced Transfection Reagent在質(zhì)粒DNA高效轉(zhuǎn)染中的應(yīng)用與技術(shù)解析
發(fā)布時(shí)間: 2026-06-30 點(diǎn)擊次數(shù): 7次質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染是分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究中的基礎(chǔ)操作,廣泛應(yīng)用于基因過表達(dá)、基因敲除驗(yàn)證和蛋白功能研究等實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景。Zeta Life Advanced Transfection Reagent是一款基于納米脂質(zhì)體技術(shù)的轉(zhuǎn)染試劑,能夠包裹質(zhì)粒DNA形成穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染復(fù)合物穿過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)并釋放核酸分子,適用于多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞系的質(zhì)粒DNA遞送。
納米脂質(zhì)體包裹技術(shù),轉(zhuǎn)染效率突出
該試劑采用納米級(jí)脂質(zhì)體包裹技術(shù),脂質(zhì)體顆粒粒徑控制在100至200納米范圍內(nèi),能夠與質(zhì)粒DNA通過靜電相互作用形成結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的脂質(zhì)體核酸復(fù)合物。復(fù)合物通過細(xì)胞膜的內(nèi)吞途徑進(jìn)入細(xì)胞后,在酸性內(nèi)體環(huán)境中脂質(zhì)體膜與內(nèi)體膜融合釋放DNA到細(xì)胞質(zhì)中。研究數(shù)據(jù)表明在HEK293T、HeLa和CHO等細(xì)胞系中該試劑的轉(zhuǎn)染效率可達(dá)百分之七十以上,且細(xì)胞毒性保持在較低水平保證了轉(zhuǎn)染后細(xì)胞的正常生長和蛋白表達(dá)。操作流程簡便,兼容血清環(huán)境
與傳統(tǒng)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑需要在轉(zhuǎn)染時(shí)去除血清不同,Zeta Life Advanced Transfection Reagent在含有血清的培養(yǎng)基環(huán)境中仍能維持轉(zhuǎn)染活性。操作流程分為三個(gè)步驟:將質(zhì)粒DNA和轉(zhuǎn)染試劑分別在無血清培養(yǎng)基中稀釋,混合后室溫孵育十五至二十分鐘形成復(fù)合物,然后將復(fù)合物滴加到細(xì)胞培養(yǎng)體系中。轉(zhuǎn)染后四至六小時(shí)可選擇更換新鮮培養(yǎng)基,二十四至四十八小時(shí)后即可檢測(cè)目的基因的表達(dá)。該流程操作簡便適合日常實(shí)驗(yàn)中的常規(guī)使用。寬廣的細(xì)胞適用范圍
該試劑已在多種細(xì)胞類型中經(jīng)過驗(yàn)證,包括貼壁細(xì)胞系如HEK293T、HeLa、A549、MCF-7等,以及半貼壁和懸浮細(xì)胞系如Jurkat和K562等。對(duì)于不同細(xì)胞類型建議根據(jù)細(xì)胞密度和生長狀態(tài)適當(dāng)調(diào)整試劑用量和DNA濃度,通常二十四孔板每孔使用0.5至1微克質(zhì)粒DNA搭配1.5至3微升轉(zhuǎn)染試劑可獲得較優(yōu)轉(zhuǎn)染效果。產(chǎn)品以即用型液體形式提供保存條件為4攝氏度有效期12個(gè)月。
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